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至宝多肽急性毒性实验[斯贝福（北京）生物科技有限公司]
研究报告
1 实验目的
开展该样品的急性毒性实验，确定最大给样品量。
2 实验动物
小鼠，体重18-22g,品系ICR,来源斯贝福（北京）生物科技有限公司。
3 动物分组
共40只动物，随机分为两组，雌雄各半，一组为给样品组，一组为对照组。
4 样品浓度及剂量
4.1给样品组:样品浓度：0.75g/ml；单次给样品体积：0.8ml/20g；24h给样品次数：3次。
4.2对照组：蒸馏水，体积及次数同上。
5 观察时间
共观察14天。
6 观察指标
6.1死亡只数：记录各组死亡的只数及时间。
6.2体重：灌胃前，灌胃第三天，第七天，第14天秤体重。死亡的小鼠在死亡时间秤体重。
6.3摄食量：每天记录摄食量。
6.4第十四天处死动物，观察各脏器有无异常。
7 统计学处理
数据以均数土标准差（平均数±S）表示，各组均数间比较釆用t检验。
8 最大耐受量试验结果及分析
8.1一般情况
第1次给样品后，立即观察，给样品组小鼠在给样品后表现为活动减少，4h后逐渐恢复正常；第2次给样品后给样品组小鼠表现同上，4h恢复正常。对照组小鼠灌胃给予与制备样品时相同体积的水后无异常反应；给样品组小鼠给样品24h后未见其他异常反应，实验小鼠的皮肤、黏膜、毛色、眼睛、呼吸中枢神经系统、自主行为等正常，继续观察14天，每天观察2次（8:00和20:00）,在观察的中给样品组小鼠同对照组小鼠一样未出现叫声异常、震颤、惊厥、运动失调、流涎、流泪、流鼻涕、呼吸困难、心跳过强或过弱、腹泻便秘肠胀气等现象，未见其他异常反应，给样品组小鼠的皮肤、黏膜、毛色、眼睛、呼吸中枢神经系统自主行为等正常，给样品14天内未岀现死亡情况。
8.2小鼠体重变化
对照组与给样品组小鼠体质量增长比较无显著性差异（P>0.05）,提示该样品对小鼠的急性毒性反应不明显。见（表1）
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表1用样品期间小鼠的体重变化情况 |
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组别 |
体重 |
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给样品前 |
给样品后 3天 |
给样品后7天 |
给样品后 14天 |
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|
空白组 |
20.4±0.6 |
24.6±0.8 |
28.1±2.6 |
34.0±6.1 |
|
给 样品组 |
20.2±0.4 |
22.2±0.9 |
27.4±2.3 |
31.8±3.7 |
8.3内脏结构观察实验第14天称重后逐只处死并解剖，肉眼观察肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、卵巢、子宫、精囊、前列腺、睾丸、胃、肠及胸腔腹腔，各器官均未出现体积颜色质地明显改变。
8.4小鼠进食量变化
对照组与给样品组小鼠进食量比较无显著性差异(P>0.05),提示该样品对小鼠的急性毒性反应不明显。见(表2)
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表2用样品期间小鼠的进食量变化情况 |
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序号 |
组别 |
进食量(g) |
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1 |
空白组 |
20.4±0.6 |
|
2 |
给样品组 |
20.2±0.4 |
9 结论
本试验中得样品是制成混悬液，理论上可以达到很大的浓度，但试验中发现过大的浓度会使灌胃器堵塞。经探索发现0.75g/ml的样品水溶液既是众多的试验浓度的最大的的浓度又是刚好全齢混悬液通过灌胃器的浓度，符合试验的要求，确定该0.75g/ml浓度为小鼠灌胃给样品的最大浓度。该样品对小鼠的最大耐受量90g/kg。以该样品人每日服用量2g计算，最大耐受量为每日服用量的297倍。
中国中医科学院中医基础理论研究所
2020月3月23日
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